Los científicos han desarrollado con éxito un nuevo método para contar proteínas marcadas en células vivas, que podría convertirse en una herramienta estándar y valiosa en la investigación biomédica.
Esta nueva y poderosa tecnología, conocida como Protein Labeling Score (ProDOL), proporciona un enfoque poderoso y versátil para determinar con precisión la eficiencia del etiquetado, la cantidad de proteínas marcadas con etiquetas fluorescentes en células vivas, en un microscopio, un aspecto crítico de la cuantificación de proteínas en biología. investigación. .
El método fue desarrollado por un equipo de investigadores de Ciencias Cardiovasculares y la Facultad de Química de la Universidad de Birmingham, en colaboración con varias instituciones internacionales. Los resultados, que resaltan el potencial de ProDOL para mejorar significativamente la precisión y confiabilidad del etiquetado de proteínas, se publicaron en un estudio reciente.
La microscopía de fluorescencia ha sido durante mucho tiempo una piedra angular de la investigación biomédica, ya que permite a los científicos detectar y analizar proteínas dentro de las células. Sin embargo, la precisión de estos análisis depende en gran medida de la capacidad de determinar la cantidad de proteínas marcadas con fluorescencia, un parámetro conocido como grado de etiquetado (DOL). Los métodos actuales para medir el grado de etiquetado tienen limitaciones, lo que a menudo da como resultado una eficiencia de etiquetado variable y señales no específicas.
ProDOL está diseñado para abordar estos desafíos proporcionando una forma rápida y confiable de medir la eficiencia del etiquetado. Esta herramienta permite la optimización de las estrategias de etiquetado de proteínas y proporciona mediciones precisas del número de copias de proteínas en las estructuras celulares.
Profesor Dirk Peter Herten, investigador principal de ciencias cardiovasculares, Universidad de Birmingham
“Con su precisión y adaptabilidad, se espera que ProDOL se convierta en una herramienta estándar y valiosa en la investigación biomédica, allanando el camino para estudios más precisos y profundos de las funciones celulares. También es muy versátil, lo que lo hace aplicable a diferentes tipos de células y. condiciones experimentales.»
«En el futuro, esto podría, por ejemplo, mejorar nuestra comprensión de los procesos de señalización celular en la activación de células inmunitarias o plaquetas relevantes en el contexto de diversas enfermedades, incluidas, entre otras, la inflamación, la inmunodeficiencia y diversas enfermedades cardiovasculares».
Aplicaciones del mundo real y direcciones futuras
En el estudio, se aplicó ProDOL para investigar cómo el VIH-1 afecta la respuesta inmune de las células T CD4.
En colaboración con el profesor Oliver Fackler del Departamento de Enfermedades Infecciosas y Virología Integrativa del Hospital Universitario de Heidelberg, esto demostró la eficacia de ProDOL en la medición del número de copias totales y activas mediante el conteo del número total y activo de proteínas accesorias en pequeñas cascadas de señalización de células inmunes. .
Además, la profesora Ursula Klingmüller del Departamento de Sistemas de Biología de Transducción de Señales del Centro Alemán de Investigación del Cáncer (DKFZ) contribuyó al diseño de las sondas para aplicaciones en células vivas, garantizando la solidez de la tecnología y su aplicabilidad en sistemas biológicos dinámicos.
El estudio fue financiado por la Fundación Alemana de Investigación (DFG), el Centro de Receptores y Proteínas de Membrana (COMPARE), la Academia de Ciencias Médicas y otros. Los investigadores expresan su agradecimiento a las diversas instituciones e instalaciones que apoyaron el proyecto.
fuente:
Referencia en la revista:
Tashev, S.A., et al. (2024). ProDOL: un método general para determinar el grado de etiquetado para mejorar la tinción y el conteo molecular. Los métodos de la naturaleza.. doi.org/10.1038/s41592-024-02376-6.